如何避免DNA鑒定的污染
發(fā)布人:admin來源:本站原創(chuàng)時(shí)間:2013年08月03日
90年代初,德國(guó)曾發(fā)生一起轟動(dòng)全國(guó)的案件,從這個(gè)連續(xù)多起殺人并偷竊的案件獲得的證據(jù)均指向同一名女性罪犯分子,她的DNA圖譜分別出現(xiàn)在40起不同案件中,并橫跨德國(guó)、奧地利和法國(guó)三地。然而16年后的真相令人啼笑皆非,這僅僅是一件因DNA污染而誤導(dǎo)警方案件調(diào)查的案例,所有案件背后并沒有令人發(fā)指的惡魔存在,所發(fā)現(xiàn)的DNA圖譜均來自于提取遺傳證據(jù)所用棉簽拭子生產(chǎn)線上的工作人員。同樣地,歐洲、美國(guó)和澳大利亞的法醫(yī)科學(xué)實(shí)驗(yàn)室也發(fā)生過類似的案例。已有資料表明,在歐洲數(shù)據(jù)庫的6百萬份罪犯的DNA信息中,已摻雜了部分刑偵人員、實(shí)驗(yàn)室研究人員和耗材生產(chǎn)人員的DNA信息。
英國(guó)法庭科學(xué)服務(wù)局(FSS)通過對(duì)比塑料耗材生產(chǎn)人員的DNA圖譜和案件中獲取的DNA圖譜發(fā)現(xiàn),用來收集、處理和分析DNA樣品的耗材在生產(chǎn)過程中發(fā)生了DNA污染。系統(tǒng)測(cè)試結(jié)果表明,每25,000個(gè)產(chǎn)品如一次性手套、反應(yīng)器皿、吸頭和棉簽拭子的生產(chǎn)過程就會(huì)產(chǎn)生一條完整的人類DNA基因圖譜的污染。因此,歐盟、美國(guó)和澳大利亞的法醫(yī)科學(xué)研究所聯(lián)盟(ENFSI, SWGDAM和BASG)提議建立行業(yè)規(guī)定,防止因錯(cuò)誤DNA數(shù)據(jù)而造成的刑偵調(diào)查投入的巨大浪費(fèi),并確保警察局登記處登記資料的準(zhǔn)確性。這些措施能大大降低生產(chǎn)過程帶來的污染,也可消除痕量DNA合成后的降解。
然而令人尬尷的事情是,在“耗時(shí)16年的德國(guó)女性罪犯“案件中使用的棉簽拭子沒有經(jīng)過“無DNA”質(zhì)檢,人們也沒有對(duì)其給予足夠的重視。直至今日,仍然沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)來確保STR(短串聯(lián)DNA重復(fù)序列)分析中所使用的耗材和試劑是不含DNA的(標(biāo)準(zhǔn):DNA濃度應(yīng)小于6pg)。因此,德國(guó)聯(lián)邦刑事警察局(BKA)聯(lián)合法醫(yī)科學(xué)研究所聯(lián)盟-ENFSI, SWGDAM和BASG-計(jì)劃定制一系列措施,確保其DNA數(shù)據(jù)庫免受事故以外的其他污染。
“這種問題是全球性的,不只德國(guó)存在”,德國(guó)聯(lián)邦刑警局DNA實(shí)驗(yàn)室副主任Ingo Bastisch博士在給DNA分析耗材廠商的信中這樣寫道。2009年,德國(guó)聯(lián)邦刑警局專家與耗材廠商在德國(guó)生命科學(xué)供應(yīng)商協(xié)會(huì)討論如何建立行業(yè)規(guī)定。為防止污染的發(fā)生,德國(guó)警局計(jì)劃設(shè)立產(chǎn)品認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)。法醫(yī)科學(xué)研究院聯(lián)盟負(fù)責(zé)建立生產(chǎn)過程中的認(rèn)證和質(zhì)控流程,以確保產(chǎn)品送至警局時(shí)都不會(huì)受到DNA污染。所有規(guī)定包括:
1. 自動(dòng)化生產(chǎn)線
2. 將工作人員與生產(chǎn)線的接觸降低到最小的程度
3. 潔凈的生產(chǎn)車間(工作人員穿隔離衣服、車間正向空氣流等)
4. 建立基于PCR的質(zhì)量控制檢驗(yàn)
5. 物理方式去除生產(chǎn)線外后續(xù)工作的人類DNA,如環(huán)氧乙烷氣體滅菌
6. 建立質(zhì)量控制體系,確保產(chǎn)品不含DNA
我國(guó)也在2009年4月,由公安部科技信息化局和刑事偵查局聯(lián)合召開DNA檢測(cè)試劑產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)及認(rèn)證工作宣貫會(huì)。會(huì)上肯定了采用國(guó)際通用的產(chǎn)品認(rèn)證,從源頭保證產(chǎn)品質(zhì)量和安全。公安部要求自2009年8月1日起,各級(jí)公安機(jī)關(guān)新采購的DNA檢測(cè)試劑產(chǎn)品,必須通過中國(guó)安全技術(shù)防范認(rèn)證中心的認(rèn)證,并加施“GA”認(rèn)證標(biāo)志。未通過認(rèn)證的DNA檢測(cè)試劑產(chǎn)品,不得用于辦案和DNA數(shù)據(jù)庫建設(shè)。
然而對(duì)于消耗品目前還沒有建立質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室對(duì)于關(guān)鍵耗材如離心管、吸頭、棉簽拭子等使用前先要自行對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制檢驗(yàn),確認(rèn)其指標(biāo)合格后才能用于DNA檢驗(yàn)。因此選擇高純度級(jí)別、提供質(zhì)檢證書的耗材,不僅可節(jié)省人力成本,更重要的是降低因人員參與而造成的自身污染或交叉污染。
為了排除參與人員對(duì)DNA鑒定結(jié)果的污染,法醫(yī)科學(xué)研究所還號(hào)召建立國(guó)際性的“DNA排查數(shù)據(jù)庫”,即將法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室人員、現(xiàn)場(chǎng)警員和生命科學(xué)耗材生產(chǎn)人員的DNA圖譜納入其中,以便排除錯(cuò)誤的基因圖譜,確保獲得正確的數(shù)據(jù)。英國(guó)國(guó)家DNA數(shù)據(jù)庫(NDNAD)是世界上最早、最大、發(fā)揮作用最好的數(shù)據(jù)庫,其中建立了現(xiàn)場(chǎng)警員排除庫、實(shí)驗(yàn)室人員排除庫和耗材生產(chǎn)人員排除庫。目前,越來越多的法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室和警局對(duì)建立匿名的、基于單位的數(shù)據(jù)庫非常感興趣?!白杂X地自我承諾使數(shù)據(jù)庫具有廣泛意義,”Eppendorf公司的Claudia Hoffmann說道,由于原有方式幾乎不可能追溯到工作人員層面,因此DNA排查數(shù)據(jù)庫這將會(huì)使追溯工作更有效。
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